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目的：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族成员.它能较特异地诱导肿瘤细胞的凋亡,而对大多数正常组织细胞没有影响,是当今肿瘤治疗的热点之一.前期研究发现,多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞株RPMI8226对TRAIL敏感,而U266对TRAIL耐药.为进一步探讨rmhTRAIL对多发性骨髓瘤细胞系的作用靶点及耐药相关蛋白,设计并实施了本研究.
方法：取对数生长期的RPMI82“细胞和U266细胞，分别加入浓度为15.625ng/mL与1000ng/mL的rmhTRAIL作用24h，并分别设置平行空白对照组。
结果：1.质谱结果：使用Sequest软件针对人类蛋白质数据库IPI Database搜索DTA文件，根据所设定参数，在四组细胞中共鉴定出2376种蛋白，其中2365种为四组细胞所共有，存于不同组别的11种蛋白功能并无特殊意义。利用在线生物信息学分析工具PANTHER对鉴定出的蛋白进行功能鉴定及初步分类，显示其中共有1430种功能明确的蛋白质。参与16类包括细胞周期、凋亡、增殖等在内的生物学过程及123种信号通路，执行多种不同生物学功能。2.rmhTRAIL,作用靶蛋白：在rmhTRAIL作用于敏感细胞株RPMI8226前后，共有351种差异蛋白;而在rmhTRAIL作用于耐药细胞株U2“前后，共有677种差异蛋白。将这两组差异蛋白再次比较，并对其中的凋亡相关蛋白进行进一步分析。
结果：显示，ASC,BAP31,PEF1,CPNS1,SEC20等5种促凋亡蛋白在rmhTRAIL作用后的敏感细胞株RPMI8226细胞中表达上调，而在耐药细胞株U266中无明显变化，提示这些促凋亡蛋白为rmhTRAIL作用于RPMI8226细胞的主要靶蛋白。
结论：rmhTRAIL诱导RPMI8226细胞凋t的可能靶蛋白为ASC,BAP31,PEF1,CPNS1,SEC200U266细胞对rmhTRAIL的可能耐药机制为泛素-蛋白酶体通路的过表达。