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目的 吗啡是一种非选择性阿片受体激动剂,吗啡预处理可通过阿片δ1受体诱导脑或心肌缺血/低氧耐受,但目前对于吗啡预处理诱导脑缺血/低氧耐受的机制还不清楚.本研究利用小鼠海马脑片离体模型探讨吗啡预处理诱导脑缺血耐受的可能机制.方法 急性分离BALB/C小鼠海马制作脑片000μm)体外孵育,分别应用吗啡不同剂量(0.1～10.0μmol/L)、不同预处理时间(5～60min)、预处理后不同间隔(5～120min),或与各种阻断剂[非选择性PKCs阻断剂chelerythrine、选择性nPKCε(novel protein kinase Cεisoform)阻断剂εV1-2、特异性CaMKⅡ阻断剂AIP、NMDA受体特异性阻断剂MK-801]共同预处理,氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)20min,模拟再灌注2h,测定OGD期和模拟再灌注期脑片孵育液中LDH漏出率；模拟再灌注2h末,脑片在2％氯化三苯基四唑氮中孵育30min,有机溶剂(无水乙醇∶二甲基亚砜=1∶1)抽提24h,测定抽提液吸光度(OD490nm),计算相对百分比代表神经元相对存活率.应用3.0μmol/L吗啡和/或50μmol/L纳络酮预处理30min,洗脱间隔30min,OGD 20min,模拟再灌注2h,分别于OGD前、OGD 20min末、模拟再灌注1h和2h取脑片液氮冻存.冻存的部分脑片分离胞浆蛋白和膜相关蛋白,部分脑片分离其总蛋白,Western blot检测nPKCe及CaMK Ⅱ α亚单位膜转位激活变化、NMDA受体NR1亚单位磷酸化水平变化以及其总蛋白表达水平.数据以均数±标准差表示,应用SPSS 11.5统计处理,组间比较One Way ANOVA, P＜0.05为差异显著性.