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定点突变是指通过PCR等方法向目的DNA片段中引入人为的变化,如插入、删除和点突变等。本实验室在克隆秦川牛PPARg基因的过程中,发现所得到的ORF全长中存在一个碱基插入,分析可能是由于PCR过程中随机突变产生的。本研究利用overlap-PCR快速实现秦川牛PPARg基因的定点突变,并将其进一步克隆至原核表达载体pET28a上,为进一步研究PPARg在牛脂肪分化中的功能奠定了基础。