【摘 要】
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目的:将外源性人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因转染体外培养的人胎儿表皮干细胞,并观察其对端粒酶活性的影响。方法;采用脂质体转染
【出 处】
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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会
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目的:将外源性人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因转染体外培养的人胎儿表皮干细胞,并观察其对端粒酶活性的影响。方法;采用脂质体转染法,将含有hTERT基因的质粒pIRES2-EGFP-hTERT和空载体质粒pIRES2-EGFP分别导入体外培养的人表皮干细胞,并用G418筛选法进行抗性克隆的筛选。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测hTERT mRNA及蛋白的表达,端粒重复序列扩增法(TRAP)-ELISA检测端粒酶活性。结果:非转染组和空载体质粒pIRES2-EGFP转染组细胞弱表达hTERT mRNA和蛋白-而质粒pIRES2-EGFP-hTERT转染组细胞强表达hTERT mRNA和蛋白;质粒pIRES2-EGFP-hTERT转染组端粒酶活性的表达量较空载体质粒pIRES2-EGFP转染组和非转染组显著升高。
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