论文部分内容阅读
目的 观察小鼠在自然动情周期下各发育阶段卵泡中PARP-1和PARP-2的表达,并通过对超促排卵的小鼠体内给予PARP抑制剂(PJ34),观察短期抑制PARP活性对小鼠获卵数及卵子质量的影响.方法 (1)20只6-8周龄雌性C57BL/6J小鼠每日行阴道涂片HE染色,根据镜检分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期4组,每组5只,在相应动情周期处死小鼠,取出双侧卵巢,免疫组化的方法检测PARP-1和PARP-2蛋白在不同发育阶段卵泡中的表达.(2)40只3-4周龄性成熟前C57BL/6J雌性小鼠,随机分成对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组共4组,每组10只,每只均采用PMSG+HCG(10IU/只)腹腔注射超排卵方案,4组均于注射PMSG24h后分别腹腔注射生理盐水或不同剂量的PJ34(6.25mg/kg,12.5mg/kg及25mg/kg).24h小时后给予HCG 10IU/只腹腔注射,14-16小时后取出双侧输卵管,解剖显微镜下取卵,观察卵子形态并记录卵细胞数量及异常卵子数量.结果 在动情周期各个阶段中,相同级别的卵泡中PARP-1和PARP-2的表达模式基本一致.原始卵泡中,PARP-1和PARP-2主要在卵母细胞浆中表达,卵母细胞核及颗粒细胞均未见PARP-1和PARP-2着色；初级卵泡中,PARP-1和PARP-2在颗粒细胞浆中表达最高,卵母细胞浆中表达量次之,差异有统计学意义(P＜0.05),卵母细胞核中未见PARP-1和PARP-2表达；次级卵泡和窦卵泡中,PARP-1和PARP-2在卵母细胞核、卵母细胞浆及颗粒细胞浆中均有表达,其中卵母细胞核和颗粒细胞浆中表达量较高,卵母细胞浆中表达较低,与前两者相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)自然状态下,PARP-1和PARP-2在小鼠卵巢内各级卵泡中均有表达,并随着卵泡的发育,PARP-1和PARP-2在各级卵泡中的表达也发生变化,具有时空特异性；(2)PARP-1和PARP-2在动情周期各个阶段中,相同级别卵泡中的表达模式基本一致,PARP-1与PARP-2在卵泡中的表达模式基本一致；(3)对进行超促排卵处理的小鼠,给予剂量范围6.25mg/kg-25mg/kg的PARP抑制剂(PJ34),能降低获卵数和升高异常卵子的比例,并具有一定的剂量相关趋势.