【摘 要】
：
通过RT-PCR的方法扩增得到猪源新城疫病毒F基因,并通过合成获得猪源新城疫病毒HN基因,通过基因克隆和重组PCR的方法构建F和HN基因突变体并分别克隆到pKS载体上,将含有T7
【机 构】
：
军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省长春市净月经济开发区柳莺西路666号
论文部分内容阅读
通过RT-PCR的方法扩增得到猪源新城疫病毒F基因,并通过合成获得猪源新城疫病毒HN基因,通过基因克隆和重组PCR的方法构建F和HN基因突变体并分别克隆到pKS载体上,将含有T7 RNAP基因的pSTK-T7-EGFP表达质粒与克隆到pKS载体上的的F和HN基因表达质粒及F和HN基因突变体质粒共转染到BHK-21细胞内进行表达,通过Giemsa染色液染色,观察细胞融合情况,通过面积判断法及细胞计数法检测细胞的融合效率,经过SPSS统计学分析,结果显示以弱毒株Ireland为参考序列构建的F基因突变株RF5,融合率为0.69±0.05,明显高于F基因和HN基因融合对照组(P＜0.05),而以水禽强毒株NDV-Dove为参考序列构建的F基因突变株RF3,融合效率为0.25±0.02,明显低于对照组(P＜0.05),由此可见,F蛋白裂解位点区的基因序列对新城疫病毒的特异性膜融合能力有一定的影响,但强毒株F基因裂解位点突变体的细胞膜融合能力并未提高,而弱毒株F基因裂解位点突变体的细胞膜融合能力却有较大的提升,说明新城疫病毒弱毒株F基因裂解位点与猪源新城疫病毒HN蛋白的膜融合作用能力高于新城疫病毒强毒株.
其他文献
目的 评价新生儿接种5微克(μg)重组乙型肝炎(乙肝)疫苗(酿酒酵母)[Hepatitis B Vaccine(HepB) Made by Recombinant Deoxyribonucleic Acid Techniques in Saccharomyces Ce
MicroRNAs (miRNAs)是一类可以通过转录后调控来调控基因表达的非编码小RNA.越来越多的研究证明miRNA在调控宿主-病原体相互作用和固有免疫中起着重要的作用.在本研究中,
背景:乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染是全球范围影响健康的重要问题,慢性感染人群存在肝硬化和肝细胞癌的高患病风险.HBV感染具有宿主特异性,在自然情况下,HBV不感
5%-25% of HIV-1 infected individuals produce broad neutralizing antibodies (bNAb).A HIV-1 vaccine (RV144) has shown a protection partially associated with e
病毒常通过各种机制抑制宿主细胞凋亡,从而促进病毒复制。博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)是一种嗜神经病毒,感染宿主后常建立起非细胞病变性持续感染。虽然目前
Background: Porcine circovirus type 2 (PCV2) is considered to be the primary causative agent of postweaningmultisystemic wasting syndrome (PMWS), which has beco
Background:Superinfection resistance (SIR) results from interactions between viruses and target cells.A better understanding of the mechanisms that determine th
Background: The capsid (Cap) protein of PCV2 is the major immunogenic protein that is crucial to induce PCV2-specific neutralizing antibodies and protective imm
Porcine circovirus type 2 (PCV2) is a major causal agent of postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) in piglets.To investigate the feasibility of P
Background: Porcine circovirus type 2 (PCV2) is associated with postweaning multisystemic wasting syndrome in pigs.A monoclonal antibody (mAb) 8E4 against the P