【摘 要】
：
目的在于获得重组猪流产嗜性衣原体(CA)POMP903蛋白,并以此作为包被抗原初步建立间接ELISA抗体检测方法,为开发猪CA ELISA诊断试剂盒奠定基础.根据国外研究结果和GenBank登录
【机 构】
：
华中农业大学动物医学院,武汉,湖北 430070
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
论文部分内容阅读
目的在于获得重组猪流产嗜性衣原体(CA)POMP903蛋白,并以此作为包被抗原初步建立间接ELISA抗体检测方法,为开发猪CA ELISA诊断试剂盒奠定基础.根据国外研究结果和GenBank登录的CA S26/3株pomp90基因序列设计引物,通过PCR扩增获得猪CACP/12株的pomp90 3基因,并将其定向克隆到原核表达载体pGEx-KG中.阳性重组质粒转化原核表达宿主菌E.coli BL21,用IPTG进行诱导表达,获得高效表达的融合蛋白.通过亲合层析纯化得到高纯度的重组POMP 3.进而以该片段作为包被抗原,建立了检测猪CA间接ELISA抗体检测方法,抗原最佳包被浓度为0.25ug/ml,包被条件为4℃12 h,血清最佳稀释度为1:400, 酶标二抗最佳稀释度为1:5 000,阳性临界值为0.39.经阻断试验、交叉试验,重复性试验和符合性试验,表明该方法特异性强,重复性好,且克服了传统间接血凝试验存在的低灵敏性和结果判断的主观性缺陷.
其他文献
2007年11月,在黑龙江省西北部发生了两起以仔猪心内膜炎和脏器血栓为特征的传染病.从病死猪心脏血栓及其它内脏器官分离出4株形态特征相似的细菌,分别命名为S201、S202、S203
某猪场先后发生三次李氏杆菌病,按李氏杆菌处理很快得到控制,但只有一次顺利地分离培养出牵氏杆菌.因此实际诊断工作要注意综合诊断,以免造成不应有的损失.
猪支气管败血渡氏杆菌是广泛感染多种哺乳动物,有时也感染人的一种常见病原菌.该菌属于波氏杆菌属,利用其粘附素和毒素对宿主致病,引起感染动物呼吸道疾病,备受人们广泛关注.
家畜魏氏梭菌病是由魏氏梭菌引起多种家畜共患的一种发病率和死亡率较高的传染病.该病临床上主要表现发病急病程短、死亡快,全身实质性器官出血,肠管出血、坏死等症状.因发病
绿菜花又名青花菜、西兰花等,其营养丰富,风味好,在我国广泛种植,深受消费者欢迎。为适应市场需求,青岛国际种苗有限公司从日本引进了歌舞伎、绿山、绿岛3个新品种,经青岛地
为了构建具有良好免疫原性的α-β1-β2融合蛋白.利用PCR技术,从含C型产气英膜梭菌a毒素基因的克隆质拉pETXAl中扩增出0.95 kb α毒素基因.将其连接到经Ncol单酶切并碱性磷酸
目的:揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原性大肠杆菌的病原型(pathotype),毒力基因及其与O血清型的关系.方法:O血清型采用常规
本实验用中间试制生产的猪支原体肺炎活疫苗(168株),在河南三个猪场进行了临床试验,先后免疫猪7千多头,观察发病率和生产指标.屠宰场跟踪随机抽样,观察屠宰后肺部病变,结果表
根据猪肺炎支原体的P36基因序列设计一对引物,建立猪肺炎支原体PCR检测方法,并对该方法进行了特异性和敏感性试验.结果成功建立猪肺炎支原体特异且敏感的PCR检测方法,可区别
猪附红细胞体病近几年开始在我国一些养猪场开始流行,给养猪生产带来巨大的经济损失,本文主要是对猪附红细胞体病的产地检疫和屠宰检疫方法进行阐述.