【摘 要】
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目的： 以He-Ne激光为代表的低强度激光因其独特的生物学效应而广泛应用于临床,并已成为临床治疗中一个重要且简便实用的辅助手段.由于激光在临床治疗输出过程中难免与器械、空气发生碰撞而出现反射、折射和散射现象,所造成的人眼视觉系统尤其是视网膜的损伤也常有报道,但目前关于其损伤的分子病理机制尚不明确.谷氨酸是中枢神经系统和视网膜中最重要的神经递质之一,在多种视网膜病变中谷氨酸的变化可造成视神经细胞的兴
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所电磁与激光生物学研究室, 北京 100850
【出 处】
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第十四届中国体视学与图像分析学术会议
论文部分内容阅读
目的： 以He-Ne激光为代表的低强度激光因其独特的生物学效应而广泛应用于临床,并已成为临床治疗中一个重要且简便实用的辅助手段.由于激光在临床治疗输出过程中难免与器械、空气发生碰撞而出现反射、折射和散射现象,所造成的人眼视觉系统尤其是视网膜的损伤也常有报道,但目前关于其损伤的分子病理机制尚不明确.谷氨酸是中枢神经系统和视网膜中最重要的神经递质之一,在多种视网膜病变中谷氨酸的变化可造成视神经细胞的兴奋毒性作用,从而引发视网膜的损伤,其中谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)发挥了重要作用.本实验拟通过免疫组化和原位杂交等方法,探讨NMDAR在激光视网膜损伤中的表达、分布规律及其可能的作用机制.方法 实验动物为清洁级成年Wistar大鼠,雌雄兼用.大鼠托品酰胺散瞳麻醉后,使用氦氖(He-Ne)激光(波长632.8 nm)垂直照射眼底,光斑直径5 mm,时间15 min.同时持续旋转大鼠的头部,避免照射点重复,并用TOPCON眼底照相机实时观察,使受激光照射的部位尽量分散地分布在整个眼底,照射过程中应用激光功率计实时监测.在激光照后的不同时间点,摘除大鼠眼球后切冰冻切片,按常规的免疫组织化学方法(SABC法)检测正常对照组和损伤组视网膜组织中NMDAR的分布和表达水平,同时利用DIG标记NMDAR1基因的多相寡核苷酸探针检测NMDAR mRNA的表达改变,最后应用CMIAS-Ⅱ图像分析仪测定其积分光密度.结果 正常视网膜中仅见有轻微的NMDAR阳性表达；在激光照射后6h,视网膜中NMDAR的表达逐渐增加,但分布较为局限,阳性部位主要位于神经节细胞层和内核层处.照后1d至3d其表达至高峰,阳性区域扩大,染色加深,且外核层亦出现棕黄色颗粒状染色；随时间推移,在照后7d至14 d,NMDAR的表达开始逐渐减弱,阳性表达区域趋于减少；阴性对照组视网膜各层未见有NMDAR mRNA阳性染色.结论 一定的条件下低强度激光照射可造成视网膜的病理性损伤,而低强度激光照射后视网膜局部谷氨酸的过度释放及NMDAR受体的高表达可能是感光神经元损伤凋亡的重要机制之一.
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