【摘 要】
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以葡萄砧木5BB离体叶柄为试材,通过农杆菌介导转化矮化rolC基因,利用共培养后GUS组织化学染色以及叶柄的再生率分析探讨了农杆菌侵染时间、共培养时间、外植体预培养时间、卡
【机 构】
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南京农业大学园艺学院,南京 210095 江苏省丘陵地区镇江农业科学研究所,句容 212400
【出 处】
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2007年全国分子生物学技术在果树上应用学术研讨会
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以葡萄砧木5BB离体叶柄为试材,通过农杆菌介导转化矮化rolC基因,利用共培养后GUS组织化学染色以及叶柄的再生率分析探讨了农杆菌侵染时间、共培养时间、外植体预培养时间、卡那霉素选择压以及头孢霉素浓度等影响转化效率的各种因素,优化了5BB遗传转化体系。结果表明:农杆菌侵染4min,共培养2d,预培养3d,卡那霉素选择压2.5mg/L,头胞霉素浓度250mg/L时可获得40％的GUS瞬时表达率,抗性苗经PCR检测,初步断定rolC基因已经整合进入5BB两个株系的基因组中。
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