双峰驼CYP3A酶体外活性检测方法的建立

来源 :第二届(2013)中国骆驼大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pkuericz
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细胞色素P450(CYP450)酶系是降解外来化学物质和药物代谢所必需物质,而CYP3A是CYP家族中最主要的功能形式.本研究将初步建立双峰驼肝微粒体细胞色素CYP3A药物代谢检测平台,对钙离子沉淀法制备的肝微粒体蛋白含量进行了测定,并同时对CYP450总酶含量、细胞色素b5酶的含量以及CYP3A的体外活性进行了检测.研究表明,钙离子沉淀法制备的双峰驼肝微粒体悬液的蛋白浓度为1.936±0.05225mg/mL,CYP450总酶的含量为0.397±0.0803nmol/mg,细胞色素b5(Cytb5)的含量为0.248±0.0704nmol/mg,红霉素-N-脱甲基酶的活性为1.3750±0.06193nmol·mg-1·min-1.通过红霉素-N-脱甲基酶的活性来评价CYP3A酶的活性,为今后开展双峰驼肝微粒体细胞色素CYP酶系其他亚型及CYP酶系体内活性等相关深入研究奠定了基础.
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