【摘 要】
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[目的]在课题组前期研究己证实黏菌素(colistin)可诱导大鼠PC12细胞(交感神经细胞系)发生自噬的基础上,进一步探讨JNK 信号通路对其调控作用。[方法]以PC12 细胞为研究对象,分别运用JNK 信号通路抑制剂(SP600125)及活化剂(anisomycin)调节JNK在黏菌素诱导的PC12细胞中的活性。通过MTT法确定SP600125和anisomycin在本试验中的最适浓度分别为2
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院,哈尔滨150030;沈阳工学院生命工程学院,抚顺113122 东北农业大
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会
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[目的]在课题组前期研究己证实黏菌素(colistin)可诱导大鼠PC12细胞(交感神经细胞系)发生自噬的基础上,进一步探讨JNK 信号通路对其调控作用。[方法]以PC12 细胞为研究对象,分别运用JNK 信号通路抑制剂(SP600125)及活化剂(anisomycin)调节JNK在黏菌素诱导的PC12细胞中的活性。通过MTT法确定SP600125和anisomycin在本试验中的最适浓度分别为20μM 和4 μM,PC12细胞经20 μM SP600125和4 μM anisomycin 预处理 1 h 后,给予 125 μg·mL-1 黏菌素作用12 h,运用real-time PCR、Western blot、透射电镜、免疫荧光和Hoechst 33258染色等方法检测细胞自噬和凋亡相关指标及形态学变化,以探讨JNK信号通路与黏菌素诱导的细胞自噬的关系。[结果](1)与空白对照组相比,黏菌素可诱导PC12细胞中JNK的活化,同时伴有Bcl2的活化,并且12 h 时间点表达量最高,Bax 表达量增加开始于12 h,并且呈现时间依赖性。
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