【摘 要】
：
目的：为了建立一种鉴别猪猪流行性腹泻强毒和疫苗毒的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法. 方法：根据猪流行性腹泻病毒基因组基因设计一对通用引物和2条特异性MGB探针,通过反应体系
【机 构】
：
中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会
论文部分内容阅读
目的：为了建立一种鉴别猪猪流行性腹泻强毒和疫苗毒的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法.
方法：根据猪流行性腹泻病毒基因组基因设计一对通用引物和2条特异性MGB探针,通过反应体系和反应条件的优化,进行特异性、灵敏度和重复性检验.
结果：该方法在通过StepOnePlus分析软件可得出该病毒强弱毒的标准曲线的相关单数(R2)均为:0.993,斜率为:-3.122,扩增效率为109.102％.扩增曲线圆滑平整且在一定范围(108拷贝/μL-102拷贝/μL)内都具有良好的线性关系.说明该标准曲线的各个点有明显的线相关性,梯度稀释很好.与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应,具有高特异性.
结论：成功建立了一种能快速、敏感、特异地鉴别猪流行性腹泻炎强毒和疫苗毒的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法.
其他文献
TRAF family member-associated NF-κB activator(TANK)is a negative regulator of canonical NF-κB signaling in the Toll-like receptor(TLR)-and B-cell receptor
探讨合适的锦鲤疱疹病毒(Koi Herpesvirus KHV)保存方法,促进KHV流行病学调查与防控以及疫苗开发等相关工作的开展.方法比较了5种不同保存条件对锦鲤疱疹病毒的影响,包括1):-
为了分析羊口疮病毒湖北株(ORFV-HB-YX株)F1L基因遗传变化规律,参照GenBank公布的ORFV-F1L基因序列设计特异性引物,对ORFV-HB株F1L基因进行PCR扩增、克隆、测序以及遗传进化
为研究金黄色葡萄球菌(S.aureus)对奶牛乳腺上皮如胞(BMEC)E-cadherin表达的影响.本研究分别采用金黄色葡萄球菌及热灭活的金黄色葡萄球菌菌液作用于BMEC,金黄色葡萄球菌以MO
为探讨生物反应器参数控制对规模化培养过程中口蹄疫病毒增殖的影响,通过L9(34)正交试验筛选温度、DO值、pH值和搅拌转速等参数对病毒繁殖的影响,确定最适过程控制参数并进行
为分析牛多杀性巴氏杆菌菌影疫苗的兔疫效力,本试验以pHH43质粒为模板,通过PCR扩增含噬菌体PhiX174的裂解基因E和CI857-PL-PR启动阻遏系统组成的温敏裂解盒CI857-PL-PR-E,再
为筛选与0型FMDV衣壳政酸感性相关的位点,通过突变相关酸敏感性位点以提高衣壳蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达量.本研究以牛源0型FMDV ON株为研究对象开展耐酸性
本文分离了2013年广东流行的3株猪伪狂犬病毒,对其gB基因进行了序列测定.取来自伪狂犬病发病猪场的46份血清,分别用广东2013毒株Heyuan2013、鄂A株和Bartha株进行微量血清中
病毒入侵如胞是病毒感染周期的初始阶段,也是病毒致病的先决条件之一.病毒入侵机制的阐明,可为开发新型抗病毒药物及方法提供参考.为了明确口蹄疫病毒入侵细胞的内吞途径及其
福建省某猪场大猪出现呼吸因难、喘气和咳嗽,病死猪肺脏有纤维素性胸膜肺炎病变,从病变肺脏中分离出一株革兰氏阴性短小球杆菌,生化试验表明该菌能发酵木糖、甘露醇、麦芽糖