利用超数排卵技术进行优化C57BL/6J小鼠的生物净化体系

来源 :华东地区第13届实验动物科学学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cser905
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目的:以近交系C57BL/6J小鼠为对象,研究不同剂量的孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促进腺激素(hCG)对小鼠超数排卵、体外授精和胚胎移植的影响,以确定最佳超排剂量,从而完善C57BL/6J小鼠为背景的转基因小鼠的生物净化体系. 方法:将5周龄的C57BL/6J雌鼠注射5、7.5、10、15IU四个剂量的PMSG,48 h后按同样方法注射HCG,进行超数排卵.然后分成三组,第一组雌鼠与雄鼠交配,怀孕18d时施行破腹取胎.第二组取卵母细胞与精子体外受精,胚胎移植产仔.第三组雌雄鼠交配,取2-细胞胚胎移植产仔.通过研究超数排卵、剖宫取胎、体外受精及胚胎移植方法的相关指标,确定C57BL/6J小鼠净化方法所需激素的最佳剂量. 结果:剖宫取胎方法中,注射5IU剂量组的C57BL/6J小鼠超排后合笼见栓率最高,为(89.00±19.05)%,但其产仔数与其它剂量组差异不显著;体外受精+胚胎移植方法中,10IU剂量组获得卵母细胞数为30.33±0.89枚,2-细胞胚胎数为23.78±0.19枚,均显著高于其它剂量组;体内受精+胚胎移植方法中,10IU剂量组2-细胞胚胎数为18.00±0.50枚,显著高于其他剂量组,但产仔率无差异. 结论:剖宫取胎法生物净化时,5IU剂量组可以提高C57BL/6J小鼠的交配成功率;胚胎移植法生物净化(包括体外或体内受精)时,10IU剂量组可以获得较多的体内和体外2-细胞胚胎,可作为C57BL/6J小鼠最佳超排剂量.
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