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目的：牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis)为证据充分的牙周致病菌之一。PG0839基因是P.gingivalis毒力岛的重要组成部分。本课题组运用等位基因同源重组技术成功构建了PG0839基因突变菌株。本次研究拟对PG0839基因对口腔上皮细胞产生炎症因子的影响进行研究，为进一步明确毒力岛基因PG0839的功能提供实验依据。
方法：培养P.gingivalis W83和PG0839基因突变菌株，将菌悬液浓度调至1×108CFU/ml。使用含10％小牛血清的低糖Dulbeccos改良细胞培养基培养口腔上皮KB细胞。使用P.gingivalis感染KB细胞，命名为实验组1；使用PG0839基因突变菌株感染KB细胞，命名为实验组2；对照组为未受细菌感染的KB细胞。将细菌与KB细胞共同孵育24 h，分别在0.5 h、2 h、6 h、12 h和24 h时，提取细胞RNA。应用白细胞介素-1β(interleukin-1，IL-1β)、IL-6、Toll样受体-4(Toll like recepector-4，TLR-4)特异性引物对各组RNA进行反转录PCR检测，使用β-actin引物作为内参。采用单因素方差分析和T检验方法对不同组别的PCR产物灰度值进行比较。
结果：当细菌和细胞共同孵育2 h和6 h时，实验组2的IL一1β mRNA表达水平显著低于实验组1(2 h：t=3.69，P<0.05；6 h：t=3.00，P<0.05)。在0.5 h和6 h时，实验组2的TLR-4 mRNA表达水平显著低于实验组2(0.5 h：t=5.269，P<0.05；6 h：t=3.00，P<0.05)。两实验组和对照组IL-1β和TLR-4 mRNA与β-ac-tin mRNA灰度值的比值之间存在显著性差异(IL-1β：F=5.81，P<0.05；TLR-4：F=3.05，P<0.05)。在24h内，两实验组的IL-6 mRNA表达水平与对照组相近。各组间IL-6 mRNA与β-actin mRNA灰度值的比值之间存在无显著性差异(F=0.90，P>0.05)。
结论：P.gingivalis感染KB细胞实验结果提示PG0839基因在P.gingivalis引发KB细胞炎症过程中发挥作用。