新型重组人肿瘤坏死因子工程菌nrhTNF的发酵工艺研究

• 作 者: 颜真[1]张英起[1]李民[2]陈常庆[2]
• 机 构: 第四军医大学生物技术中心
• 出 处: 2000年中国药物生物技术学术研讨会
• 发表日期: 2000年期
• 关键词: 肿瘤坏死因子 基因工程 大肠杆菌 发酵工艺

为了配合新型重组人肿瘤坏死因子(nrhTNF)的临床研究，建立nrhTNF的发酵工艺，该文首先研究了nrhTNF工程菌在试管和三角摇瓶中的生长和表达规律，筛选确定了其最适宿主菌、最佳培养基及最佳诱导表达条件，然后对DH5a/pBV-TNF工程菌在5L自控发酵罐中进行了分批补料培养，结果表明，该工程菌培养至终密度30A<,600nm>左右时，目的蛋白的表达可保持在菌体总蛋白的50℅附近，发酵时间在12～13h之间；随着菌体密度增高，目的蛋白的表在量逐渐降低，至60A<,600nm>时，nrhTNF的表达仅占菌体总蛋白的10℅左右。根据以上研究结果确定了周期短，产量高且稳定可靠的发酵工艺，为nrhTNF的工业化生产奠定了基础≈