烟粉虱MED隐种Dnmt1的克隆及温度耐受性分析

来源 :中国昆虫学会2016年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dkmlyn
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  [目的]烟粉虱MED隐种自入侵我国后凭借其极强的生态适应性迅速侵入到我国绝大部分地区.DNA甲基化作为表观遗传的一个重要方面在调节入侵昆虫的生态可塑性中可能起到较大作用.为阐明DNA甲基化在烟粉虱MED隐种温度胁迫耐受性中的作用机理,本研究克隆了烟粉虱MED隐种DNA甲基化转移酶(Dnmt1基因,并探讨了该基因在温度胁迫中的作用.[方法]本文利用RACE-PCR方法克隆了烟粉虱MED隐种Dnmt1基因的全长cDNA序列,并采用RNAi技术对该基因的温度耐受性功能进行了验证.[结果]序列分析结果显示,Dnmt1开放阅读框全长为4287 bp,编码1428个氨基酸,其推导的氨基酸序列具有Dnmt1蛋白的典型结构,即N端调控区的复制叉作用位点、锌指结构域、两个BAH结构域及C端催化活性结构域Dcm.RNAi结果发现该基因表达量显著降低且能显著影响烟粉虱响应温度胁迫的存活率.[结论]获得了烟粉虱MED隐种Dnmt1基因的cDNA全长,Dnmt1在烟粉虱MED隐种的温度耐受性中起关键作用,为进一步研究DNA甲基化的功能及作用机理奠定了基础.
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