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研究目的：布鲁氏菌是一种革兰氏阴性、兼性胞内寄生致病菌,侵染力和传染性强,传播途径传播范围广泛.布鲁氏菌病现已波及全球近90％的国家和地区,每年造成数以亿计的经济损失[1].布鲁氏菌有自己特有的生物活性,具有独特的生物学功能,与宿主的免疫间存在相互联系,具有复杂的信号调控网络,因此在粗糙型牛种布鲁氏菌感染下探索NF-κB 信号通路是否直接调控细胞的凋亡,来影响布鲁氏菌在巨噬细胞内的存活是十分重要的,为进一步明确布鲁氏菌感染后逃避宿主免疫系统的机制,为我们寻找新型的布鲁氏菌控制策略提供新的方向和奠定理论基础.本实验首先建立布鲁氏菌侵染模型,应用Western-blot技术检测布鲁氏菌RB51 侵染下NF-κB 信号通路的活性；对抑制剂进行毒性检测后,RB51 侵染用不同浓度抑制剂处理后的巨噬细胞,Western-blot 检测NF-κB信号通路的活性；RB51 侵染下流式细胞仪检测不同时间段细胞凋亡.材料方法：1.粗糙型牛种布鲁氏菌RB51 的PCR 鉴定；2.粗糙型牛种布鲁氏菌RB51 分别以0,6,12,24,48 h 侵染巨噬细胞后收集蛋白后进Western Blot 检测NF-κB信号通路激活状态(0 h 是对照组)；3.NF-κB 抑制剂5、10、15μmol/L 孵育细胞后,用粗糙型布鲁氏菌RB51 侵染12h 后Western-blot 检测NF-κB 信号通路激活状态；4 粗糙型牛种布鲁氏菌RB51 侵染细胞流式细胞仪检测巨噬细胞的凋亡率.结果：本试验中我们发现在RB51 侵染下,能够强烈激活NF-κB 信号通路,且存在时间依赖性,在12h 左右激活能力最高,同时不同浓度的抑制剂BAY11-7082 对该通路的抑制作用也有差异,在加入10μmol/L 抑制剂后NF-κBp-p65 的磷酸化程度迅速降低,且存在最佳抑制浓度；NF-κB 信号通路抑制剂BAY11-7082 可以影响布鲁氏菌侵染下细胞的凋亡.讨论：粗糙型布鲁氏菌能够激活NF-κB 信号通路,可能由于缺失了WboA 基因,强烈激活NF-κB 通路,促进了细胞凋亡,降低了布鲁氏菌的部分逃逸能力,LPS 介导的细胞炎症反应是一个典型的病原体与机体相互作用的过程[2],由此可以猜测是布鲁氏菌LPS 影响着通路的活性从而通过通路的调控进而影响细胞的凋亡,为布鲁氏菌在细胞内的存活提供条件.总而言之,NF-κB 信号通路在粗糙型布鲁氏菌RB51 侵染巨噬细胞的过程中发挥了重要作用,影响着布鲁氏菌在胞内的存活,为研究布鲁氏菌免疫逃逸以及胞内持续感染的初步机制研究奠定了基础.