【摘 要】
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目的:研究阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制。 方法:临床分离到一株碳青霉烯耐药的阴沟肠杆菌ZY1465。对该菌株进行药物最低抑菌浓度(MIC)测定、接合试验、质
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目的:研究阴沟肠杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制。
方法:临床分离到一株碳青霉烯耐药的阴沟肠杆菌ZY1465。对该菌株进行药物最低抑菌浓度(MIC)测定、接合试验、质粒图谱分析、等电聚焦电泳(IEF)、特异性PCR扩增和DNA序列分析以及外膜蛋白分析等。
结果:阴沟肠杆菌ZY1465对亚胺培南和美罗培南的MIC均为32μg/ml,此外还对青霉素类、头孢菌素类、头孢西丁、氨曲南、喹诺酮类和氨基糖苷类等多种抗生素呈高水平耐药。接合试验使受体菌大肠杆菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性明显降低(MIC由接合前的≤0.125μg/ml变为接合后的2μg/ml)。质粒酶切图谱分析表明接合子的质粒与此前本实验室发现的粘质沙雷菌ZN008中编码blaKPC-2基因的质粒完全相同。等电聚焦显示阴沟肠杆菌ZY1465产等电点(pI)分别为5.4、6.7、7.3、7.8、7.9和8.6共六种β-内酰胺酶,接合子只产等电点6.7一种β-内酰胺酶。特异性PCR扩增和测序证实该菌中存在TEM-1(pI 5.4)、KPC-2(pI 6.7)、DHA-1(pI7.8)、CTX-M-14(pI 7.9)、CTX-M-3(pI 8.6)和染色体AmpC(IEF中未检测到)等耐药基因,等电点为7.3的酶有待进一步研究。外膜蛋白的尿素-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea-SDS-PAGE)分析显示阴沟肠杆菌ZY1465有38kDa蛋白条带的缺失。
结论:首次在国内分离到产KPC-2型碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌,多种β-内酰胺酶尤其是KPC-2的产生合并外膜蛋白缺失引起阴沟肠杆菌ZY1465对碳青霉烯类抗生素耐药。
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