【摘 要】
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猪囊尾蚴病(cysticercosis)是一种危害严重的人兽共患寄生虫病,被世界卫生组织列为17种被忽略的热带病之一.该病呈世界性分布,在东南亚、中美洲、拉丁美洲、南非一些相对
【机 构】
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家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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猪囊尾蚴病(cysticercosis)是一种危害严重的人兽共患寄生虫病,被世界卫生组织列为17种被忽略的热带病之一.该病呈世界性分布,在东南亚、中美洲、拉丁美洲、南非一些相对落后的地区广泛流行.在我国,以东北、西南、西北地区较为多见.目前,猪带绦虫(Taenia solium)中国株和墨西哥株全基因组测序及注释已经完成.通过基因组序列比对与分析,发现猪带绦虫缺失了一些非寄生动物共有的基因及通路,但其热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)基因家族却存在种特异性显著扩增.系统进化研究发现,HSP70基因在猪带绦虫基因组内的拷贝数至少为32,远远高于在其他物种基因组内的拷贝数.虽然HSP70已经在猪带绦虫外泌蛋白中被发现,但此类蛋白是否在寄生虫与宿主互作过程中发挥作用及其作用机制仍不明确.且HSP70具有分子伴侣的作用,其作为潜在的抗原或者佐剂蛋白,在寄生虫疫苗中免疫保护作用也不清晰.HSP70家族成员较多,主要包括HSP70-1a、HSP70-1b、HSP70-11、HSP70-2a、HSP70-2b、HSPA3、HSP70-4、HSP70-5、HSP70-6、HSP70-7、HSP70-8和HSP70-9.除了HSP70-4,其他几种蛋白在亚细胞内的定位均已明确.本实验利用猪带绦虫基因组注释信息,设计引物鉴定HSP70-4基因.反转录扩增获得了大小为1953bp猪带绦虫HSP70-4ORF序列.对其基因编码序列密码子进行优化后,与载体pPIC9K相连接,并在毕赤酵母中获得高效表达.经SDS-PAGE、Western-biot及氨基酸测序后证明,本实验成功表达出猪带绦虫HSP70-4,为后续研究HSP70-4在亚细胞内的定位、猪带绦虫与宿主间的相互作用以及其免疫保护作用奠定了基础.
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