【摘 要】
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苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV),是我国已鉴定明确的6种苹果病毒之一,属潜隐性病毒,在我国各苹果产区普遍存在,对苹果植株的为害较大.2012年4
【机 构】
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西南大学植物保护学院,植物病害生物学重庆市高校级重点实验室,重庆400716
【出 处】
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中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会
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苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV),是我国已鉴定明确的6种苹果病毒之一,属潜隐性病毒,在我国各苹果产区普遍存在,对苹果植株的为害较大.2012年4月和7月,我们先后从山东青岛、烟台和陕西渭南、咸阳各采集了20份、34份、21份和29份苹果叶片样品.利用PCR技术对其进行针对苹果褪绿叶斑病毒的特异性检测.各地随机选取3份样品,利用试剂盒(RNAprep Pure Plant Kit)提取植物总RNA,以之为模板,用反转录试剂盒(PrimeScript RT reagent Kit)合成第一链cDNA,以此为模板利用ACLSV的特异性引物ACLSV-F(5-AGAAATAATGGAAAGACAGGGG-3)/ACLSV-R(5-AAGGCTCAAACAAACTAAATGC-3)扩增病毒的部分片段.结果表明：12份样品中,有10份样品扩增出一条约500bp左右的特异性条带,而健康植株中未扩增到此特异性条带.选取样品QD-20进一步克隆测序,将测序所得的序列在NCBI数据库中进行比对,检索比对的结果显示,该样品500bp左右的片段与数据库中的ACLSV各分离物的核苷酸序列相似性为91％ ～98％,表明从苹果样品QD-20中扩增到的是ACLSV的一个分离物.
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