【摘 要】
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毛细管等电聚焦(CIEF)是已知的蛋白质分析中技术中分辨率最大的技术之一,这对于复杂的生物体系的分析,有着极大的吸引力。但是,与疾病息息相关的具有生物活性的蛋白往往是极其微
【机 构】
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天津大学药物科学与技术学院,天津300072
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毛细管等电聚焦(CIEF)是已知的蛋白质分析中技术中分辨率最大的技术之一,这对于复杂的生物体系的分析,有着极大的吸引力。但是,与疾病息息相关的具有生物活性的蛋白往往是极其微量的,而CIEF技术由于样品载样量低,检测灵敏度往往不够。为此,我们试图将ClEF技术拓展到大管电泳(内径为1毫米以上)系统中,建立大管等电聚焦(WIEF)技术。本报告拟介绍WIEF技术的理论基础,搭建原理,和在蛋白质分析中的初步应用。在优化的条件下,单亚型标志蛋白牛血清白蛋白和多亚型标志蛋白伴清蛋白均得到了很好的分离,同时0.055 ml的五种变异血红蛋白也得到了非常好的分离。实验表明,由于载样量的大大提高,WIEF具有比CIEF高很多的检测灵敏度。它既可用于低丰度蛋白组分的研究,又可直接进行后续的蛋白质鉴定,可作为一种新型的常规的制备型蛋白质分析技术使用。
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