【摘 要】
：
以质粒pSilencer2.1-U6 Hygro为基础,设计并构建了针对狂犬病病毒(RV)糖蛋白和核蛋白mRNA的共9个siRNA表达载体,转染BHK-21细胞系后,在潮霉素-B的筛选压力下,获得9个稳定转录
【机 构】
：
军事医学科学院,军事兽医研究所,吉林,长春,130062
论文部分内容阅读
以质粒pSilencer2.1-U6 Hygro为基础,设计并构建了针对狂犬病病毒(RV)糖蛋白和核蛋白mRNA的共9个siRNA表达载体,转染BHK-21细胞系后,在潮霉素-B的筛选压力下,获得9个稳定转录相关siRNA的BHK-21细胞株.1000TCID50的RV分别感染24孔板内的上述9株细胞,48h后以直接免疫荧光法检测各株细胞上RV的增殖,结果显示,RV增殖水平最低者为对照细胞的1％,即RNA干扰效应最高可阻断99％RV的感染.针对其中阻断水平超过90％的靶序列G69和N19,人工合成其双链siRNA,瞬时转染BHK-21细胞后,仍可达到80％以上的感染阻断率.针对靶序列G69的siRNA表达质粒300ug肌注小鼠后肢,再以350 LD50狂犬病病毒同部位注射攻毒,保护率为80％.本试验为有效阻断RV早期感染提供了新选择,为通过RNAi研究RV的基因组功能奠定了基础.
其他文献
1969年Inman等[1]首次报道了12例因注射污染脓肿分枝杆菌的组织胺而引起的注射后脓肿.以后,该菌污染医院环境引起的散发感染甚至暴发流行的报道增多[2-5],并逐渐成为医院内感染的重要病原菌.由于对大多数抗生素,尤以抗结核药物不敏感,且无恒定的敏感药物,给治疗带来极大困难.因此,防止该菌的感染具有重要意义.现就脓肿分枝杆菌对理化因子的抵抗力进行研究,以利于更好地预防该菌引起的医院内感染。
塑苫长期结晶工艺已广泛应用,旧的保卤方式很难适应生产需求,本文对改造塑苫保卤圈的面积比进行理论计算,以指导滩田工程改造,提高滩田改造效益.
文章运用6西格玛理论,在海盐生产中对影响海盐生值的6西格玛水平进行控制探讨分析,针对存在的问题,并提出提高饱和卤水的相应对策.
真空制盐行业循环冷却水的用量很大,如何减少补水,减少污水排放,减轻周边环境的水体污染状况,缓解企业与企业、企业与居民之间对水资源的争夺矛盾和消除企业排污对农作物、居
介绍利用管道兑卤法提高精制盐白度,降低可溶性杂质的方法.此方法经济简便,效果比较明显,是生产优级精制盐、提高白度的可靠途径.
本文是中国制药发展高层论坛暨中国化学制药工业协会六届二次理事扩大会议上的发言，发言探讨了医疗与医药相配套相衔接的体制改革思路等等内容.
本文是中国制药发展高层论坛暨中国化学制药工业协会六届二次理事扩大会议上的发言，发言探讨了化学制药发展的问题,研究制药企业发展的问题,研究解决广大人民群众看病难、看病
本文主要对印染涂料由于环保原因被禁用的化学原理进行了剖析,同时对目前符合环保要求的印染涂料作了简单的介绍.
中国化学制药工业协会中国制药发展高层论坛暨六届二次理事扩大会今天隆重召开了,来自全国各地的协会理事和行业的专家、学者,将在会议期间总结近几年协会的工作,同时分析制
本文主要从清洁生产角度阐述现阶段印染行业的环保治理,重点是印染废水处理及回用工艺.根据印染废水的来源不同,具体分析了其水质特点及排放规律,通过实践操作运行,建议解决