【摘 要】
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本试验以改进的CTAB法提取榆黄蘑菌丝体的总DNA,研究模板DNA量、引物浓度、dNTPs浓度、Mg浓度、TaqDNA聚合酶用量等对ISSR-PCR的影响,优化PCR反应体系。试验结果,ISSR-PCR条
【机 构】
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福建农林大学菌物研究中心,福建福州 350002
【出 处】
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第八届全国食用菌学术研讨会暨新产品新技术交流会
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本试验以改进的CTAB法提取榆黄蘑菌丝体的总DNA,研究模板DNA量、引物浓度、dNTPs浓度、Mg<2+>浓度、TaqDNA聚合酶用量等对ISSR-PCR的影响,优化PCR反应体系。试验结果,ISSR-PCR条件为:模板50ng/25μl,引物浓度0.42μmol/L,dNTPs 100μmol/L,Mg<2+> 1. 5mmol/L. TaqDNA聚合酶2.0U,10×buffer2.5μl,用ddH<,2>O将总体积补至25μl,退火温度为42℃。
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