【摘 要】
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为实现猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的ORF5和ORF6基因在同一质粒中分别表达各自编码的蛋白,发挥E蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势，本研究构建了pIRES-ORF5/ORF6转移载体
【机 构】
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山东省农业科学院畜牧兽医研究所,济南,250100 莱阳农学院,青岛,266109
【出 处】
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山东畜牧兽医学会养猪专业委员会第一届学术研讨会
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为实现猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的ORF5和ORF6基因在同一质粒中分别表达各自编码的蛋白,发挥E蛋白的病毒中和优势和M蛋白的细胞免疫优势，本研究构建了pIRES-ORF5/ORF6转移载体用脂质体法转入稳定表达的细胞CHO,经G418加压筛选获得稳定表达的细胞株,以RT-PCR、SDS-PAGE、western blot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。结果表明：RT-PcR检测到两种目的基因的转录；SDS-PAGE检测到同时表达的两种目的蛋白；间接免疫荧光检测到目的蛋白得到表达。Western blot证实表达的两种蛋白具有免疫活性,为PRRS亚单位疫苗的研制奠定了理论和物质基础。
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