【摘 要】
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家蚕素Ⅱ(Bombyxin-Ⅱ,BBXⅡ)的氨基酸序列及其调节糖代谢的功能与哺乳动物胰岛素具有较高的相似性,以家蚕作为研究胰岛素作用机理和糖尿病模式生物有其独特优势,而且家
【机 构】
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山东农业大学林学院,山东泰安271018
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家蚕素Ⅱ(Bombyxin-Ⅱ,BBXⅡ)的氨基酸序列及其调节糖代谢的功能与哺乳动物胰岛素具有较高的相似性,以家蚕作为研究胰岛素作用机理和糖尿病模式生物有其独特优势,而且家蚕素有望开发成为新型降血糖药物.为建立一种简便、快速且能大量获得BBXⅡ的有效方法,本试验从家蚕头部mRNA 中经过反转录获得Bombyxin-Ⅱ基因的cDNA,并构建了原核表达载体pET28a- BBXⅡ,经过IPTG 诱导,使BBXⅡ获得了大量表达,进一步用HisTrap HP 亲和层析,成功得到大量纯化的BBXⅡ.利用纯化的BBXⅡ制备了BBXⅡ的兔多克隆抗体,对家蚕戊3-己2 期胚胎及家蚕幼虫脑-咽侧体联合体进行了BBXⅡ抗体染色,但均未获得预期的对BBX 分泌细胞的特异性染色结果,不过发现该抗体能够对胚胎期的蜕皮腺和丝腺进行特异性染色,因此BBXⅡ抗体可以作为胚胎期特异性识别蜕皮腺和丝腺的有效试剂.研究比较了BBXⅡ和人胰岛素的降血糖作用,结果证明,无论对正常饲养的家蚕幼虫、饥饿幼虫或注射糖尿病诱发剂的幼虫,注射BBXⅡ后均在一定时间内引起血液中海藻糖含量显著降低,海藻糖酶活性升高.对BBXⅡ和胰岛素的降血糖作用比较发现,无论对正常饲养的小鼠,还是利用链脲菌素诱导的糖尿病小鼠,注射BBXⅡ的降血糖效果均与胰岛素相近,并表现出一定的剂量依赖性.另外还发现,给家蚕注射人的胰岛素,也能极显著地降低家蚕的血糖,并显著提高血液中海藻糖酶的活性.说明家蚕的BBXⅡ与人的胰岛素无论对家蚕还是对哺乳动物均具有相似的调节血糖的生理功能,它们不仅在结构上相似,而且在生理作用上的进化也是相似和保守的.本试验不仅证明了家蚕是一种理想的胰岛素类药物的试验动物,为今后开展胰岛素类药理学和糖尿病病理学研究提供了一条更加简单的途径,而且为开发BBX 新型降血糖药物奠定了重要基础.
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