动脉粥样硬化相关基因ZNF580原核表达载体的构建与鉴定

• 作 者: 孙慧燕 张文成 孔麟麟
• 机 构: 武警医学院生理学与病理生理学教研室
• 出 处: 2008天津市老年医学学术年会
• 发表日期: 2008年3期
• 关键词: 动脉粥样硬化 ZNF580基因 原核表达载体 多克隆抗体 DNA序列

目的：构建动脉粥样硬化相关基因ZNF580的原核表达载体，为获得大量重组ZNF580蛋白并制备其多克隆抗体和确定ZNF580所调控的顺式作用元件DNA序列奠定基础。
方法：根据ZNF580cDNA序列的开读框架设计上、下游引物，利用PCR技术扩增ZNF580开放阅读框cDNA序列，将PCR扩增的目的片段与载体pET42a分别双酶切、回收纯化后做定向连接，Bg/Ⅱ、XhoI双酶切电泳筛选、鉴定并测序。
结果：双酶切pET42a-ZNF580，电泳分析插入片段长度为524 bp，与预期的结果一致，经连接点两端进行测序，测序结果显示接头两端序列连接正确。
结论：成功构建原核表达载体pET42a-ZNF580。