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电致化学发光作为一种高灵敏度，高选择性的分析方法，近来受到广泛的关 注。核酸适配体是通过SELEX技术筛选出来单链寡聚核苷酸，相对于抗体适配体不 但具有较高的特异性，而且具有很好的稳定性。本文通过纳米金胶与2,2-钌联 吡啶Ru(bpy)3 2+形成复合物固定在电极表面，利用二茂铁能够高效率猝灭钌联吡啶 化合物电致发光的性质，结合交联探针结构，构建了一种高灵敏的电致化学发光 检测凝血酶的新型适配体电致化学发光生物传感器，其原理如图1所示。首先，将 Ru(bpy)3 2+与纳米金形成的复合物，经巯乙胺将其偶联到金电极上，再通过Au-S键 将交联结构的探针组装到纳米金胶上。形成交联结构的3条DNA探针包括：（1）固 定探针是一端修饰巯基的DNA序列；（2）捕获探针是凝血酶的适配体DNA序列；（3） 信号探针是一端修饰二茂铁的DNA序列。当交联结构被修饰在电极表面上时，二茂 铁分子可以近距离接触固定在电极上的金钌复合物，对其ECL产生高效碎灭，使修 饰电极的ECL强度较低。通过凝血酶与捕获探针的核酸适配体的特异性结合，打开 交联结构的肩部互补碱基对，使得含有二茂铁信号探针远离电极表面，通过前后 电致化学发光的差值来定量测定凝血酶。以此适配体生物传感器来检测凝血酶， 达到良好的效果，线性范围为0.05pM-100pM，检测限达到8.0×10.15M。