【摘 要】
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本课题组前期应用抑制消减杂交、基因芯片、斑点杂交等技术筛查并验证了在胃癌发生、进展不同阶段组织标本中呈差异表达的一些重要基因,提示它们与胃癌发生、进展密切相关。核糖体蛋白S12(Ribosomal protein S 12,RPS12)基因是其中的重要基因之一。在此基础上我们进一步研究了RPS12对胃癌细胞生物学特性的影响。结果表明,RNA干扰沉默RPS12基因表达后,胃癌细胞增殖力降低,而凋亡率
【机 构】
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中国医科大学医学遗传学教研室 沈阳,110001
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本课题组前期应用抑制消减杂交、基因芯片、斑点杂交等技术筛查并验证了在胃癌发生、进展不同阶段组织标本中呈差异表达的一些重要基因,提示它们与胃癌发生、进展密切相关。核糖体蛋白S12(Ribosomal protein S 12,RPS12)基因是其中的重要基因之一。在此基础上我们进一步研究了RPS12对胃癌细胞生物学特性的影响。结果表明,RNA干扰沉默RPS12基因表达后,胃癌细胞增殖力降低,而凋亡率明显增加。因此,我们推测RPS12可能对胃癌细胞化疗敏感性有影响,并对此展开研究。目的:观察RNA干扰沉默胃癌BGC823细胞中RPS12表达对顺铂敏感性的影响。方法:RPS12特异性shRNA表达载体转染胃癌细胞BGC823; RT-PCR、Western Blot方法检查RPS12基因表达,明确基因沉默效应;应用顺铂处理胃癌细胞, MTT检测细胞增殖能力。结果: RT-PCR、Western Blot结果显示,RPS12特异性shRNA表达载体转染胃癌BGC823细胞第5天后,细胞中RPS12 mRNA及蛋白表达明显降低,证明RNA干扰可有效抑制胃癌细胞中RPS12表达。用不同浓度的顺铂处理后,RPS12沉默组细胞的增殖力显著低于对照组;顺铂对RPS12沉默细胞的半数抑制浓度IC50显著低于对照组。结论:RPS12表达沉默后,胃癌细胞BGC823对化疗药物顺铂的敏感性增加。
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