西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定

• 作 者: 马健男;吴东来;杨涛;王群;张维军;徐青元;田野;林燕;宋红梅;步志高;
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,农业部兽医公共卫生重点开放实验室,哈尔滨 150001
• 出 处: 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会
• 发表日期: 2009年期

通过PCR方法扩增西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS1),其分子质量约为90 ku,大约占可溶性菌体蛋白的50％。利用直链淀粉树脂柱对MBP-NS1纯化后的重组蛋白的纯度达到60％,Western-blot和间接ELISA检测证明纯化的MBP-NS1具有良好的抗原性和特异性。