活血注射液对OX-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化和黏附作用的影响

来源 :第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hy009009
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目的:观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HuVEC)的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞粘附作用的影响,并探讨核转录因子ka:ppa B(NF-kB)在其中的调控作用。 方法:以培养人脐静脉内皮细胞(HUVE(:)作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)制备细胞损伤模型。以MTT法检测经不同浓度活血注射液处理214 h后HUVEC活性的变化,并确定活血注射液的高、中、低浓度;采用蛋白定量法检测HUVEC与单核细胞的粘附率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HUVEC的ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达;用流式细胞仪测定HUVEC的ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达;用免疫细胞化学法和图象定量分析系统测定内皮细胞中NF-kB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值。 结果:5.00-40.00 mL·L-1的活血注射液可明显提高HUVEC的生长活性。ox-LDL作用HUVEC后12、24h时,人单核细胞与HUVEC的粘附率显著升高,HuVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高,均明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),ox-LDL作用HUVEC后24h时,内皮细胞NF-kB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高,明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的粘附率和HUVEC ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平,以及显著降低HUVEC中NF-kBp65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值,与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05,JP<0.01),这种作用随着剂量的增加而增强。 结论:活血注射液在一定浓度范围内可增强HUVEC的生长活性。活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞粘附,其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-kB p65的活性,从而发挥对血管内皮细胞的保护作用,有利于减少或抑制动脉粥样硬化的形成。
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