【摘 要】
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利用A型流感单克隆抗体和胶体金标记技术,建立了快速检测AIV的DIGFA法.检测时先将单抗点样于NCM中央,封闭后与待检抗原作用10min,洗涤后再与胶体金标记的纯化兔抗AIVIgG作用5
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会
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利用A型流感单克隆抗体和胶体金标记技术,建立了快速检测AIV的DIGFA法.检测时先将单抗点样于NCM中央,封闭后与待检抗原作用10min,洗涤后再与胶体金标记的纯化兔抗AIVIgG作用5min,洗涤后观察.在膜上出现红色斑点的为阳性,不出现斑点为阴性.用此法检测AIV H<,5>N<,1>、H<,9>N<,2>、SIV毒株均为阳性,而NDV、IBDV、EDSV及IBV等均为阴性;对AIV H9N2纯化抗原及含毒尿囊液最低检出量分别为1.799ng/点(2μl)、10<3>EID<,50>;检测AIV H<,9>N<,2>在鸡胚中繁殖时以66~92h含毒量最高;检测H<,9>N<,2>攻毒的SPF鸡泄殖腔棉拭子,至少感染后4~6天内可检出病毒,与病毒分离结果一致;对H<,5>N<,1>攻毒死亡鸡气管的病毒检出率80﹪;自然感染鸡气管10份能检出9份,与病毒分离的阳性符合率在90﹪以上.实践证明该法具有A型流感群特异性,可用于AIV早期诊断,其快速、敏感、简便,不需特殊设备、20~30分钟就能判定结果等特点,更适于基层实验室或现场应用.
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