【摘 要】
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目的:石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是大分子DNA病毒,近年来对石斑鱼养殖产业造成严重经济损失.因此急需发展可以快速检测和抑制SGIV感染的技术手段.
【机 构】
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中国科学院南海海洋研究所中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室,广州510301
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目的:石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)是大分子DNA病毒,近年来对石斑鱼养殖产业造成严重经济损失.因此急需发展可以快速检测和抑制SGIV感染的技术手段.
方法:利用指数富集的配基进化技术(SELEX),针对SGIV感染的石斑鱼细胞进行筛选特异性的核酸适配体(Aptamer).
结果:获得四条特异性的Aptamer.二级结构的预测结果发现,核酸适配体均形成典型的颈-环结构.细胞毒性试验和组织水平的观察结果显示,筛选得到的核酸适配体无任何毒副作用.筛选得到的核酸适配体不仅可以特异性地识别并结合SGIV感染的细胞,而且可以在组织水平上检测到SGIV的感染.其中,核酸适配体L1与SGIV感染的细胞的结合亲和常数最高,为71nM.筛选得到的核酸适配体可以抑制病毒的感染,其中适配体L1的抑制效果最明显,并且以梯度依赖的形式抑制病毒的感染.
结论:研究首次运用SELEX技术筛选与海洋鱼类大分子DNA病毒SGIV感染的细胞特异性结合的核酸适配体,这些核酸适配体作为抗病毒候选药物或用于病毒检测,具有极为广阔的应用前景.
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