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中华鳖是重要的名特优水产养殖动物,由于缺少商品化的细胞系,其病毒性疾病的防治研究难以深入开展;本研究旨在建立连续的中华鳖心肌成纤维细胞系。以中华鳖心肌组织为材料,采用半消化法对心肌组织进行消化,将心肌组织剪成1 mm3的组织块,之后转入25cm2细胞培养瓶,使之均匀铺满瓶底,添加2ml培养液倒置培养,3d之后补充培养液至10ml并翻转培养瓶正置培养。采用RPMI1640, MEM,DMEM 3种培养基,没置血清浓度10%,15%和20%3个浓度梯度,分别在30℃和28℃两个温度条件下培养。