【摘 要】
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色谱特别是液相色谱与质谱联用(LC-MS)是目前超复杂样品分离分析研究的主力工具之一,涉及包括组学、医药、环境、植物学等在内的众多实际应用领域。但我们在分析测定活体
【机 构】
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中国科学院化学研究所,北京中关村北一街2号,100190;中国科学院大学,北京市石景山区玉泉路19号(甲)100049;北京分子科学国家实验室,北京中关村北一街2号,100190中国科学院化学研究所,
【出 处】
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第34届(2016)中国质谱学会学术年会
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色谱特别是液相色谱与质谱联用(LC-MS)是目前超复杂样品分离分析研究的主力工具之一,涉及包括组学、医药、环境、植物学等在内的众多实际应用领域。但我们在分析测定活体生物样品时,却面临了样品来源有限和测定成分含量过低的挑战,LC-MS通常就发挥不出作用了。虽然灵敏度更高、质量更好的新型质谱仪在不断涌现,但依然不能满足超微量样本中超痕量成分测定特别是定量测定的需求,而且还会导致时间和经济成本的节节攀升。为此,我们开始了探索发展化学辅助增敏的方案,以期尽快建立低成本的高灵敏LC-MS定量测定方法。具体的思路是：利用微量或超微量化学反应技术来标记痕量或超痕量目标成分,借此提高离子化效率,进而提高LC-MS定量测定的灵敏度。经过大量系统的研究发现,虽然化学方法无需对仪器做"伤筋动骨"的改造,且反应资源丰富,可开发余地大,但真正能够用于解决分析问题的化学反应却是不多的。有些反应可缩微到亚毫克水平,但反应不定量；或者相反,有些反应符合定量要求,但不能缩微到限量样本的程度。目前我们仅发现一种能够解决问题的途径,就是开发一步但包括异构化的反应。据此,我们以超痕量的植物激素如赤霉素的测定为目标展开了研究,挖掘了一个能够满足要求的化学反应,可直接衍生1 pM甚至更低浓度的赤霉素,进而建立了能够直接测定微克级样本中pM-fM级赤霉素的LC-MS定量分析方法,已用于测定约20微克新鲜模型植物拟南芥花蕊中赤霉素的含量,初步揭示了赤霉素在整花、花瓣、花蕊中的分布及其变化。所建方法可扩展用于氨基酸、小肽等其他生物活性物质的测定。此研究说明,质谱与化学方法的完美结合,是提高质谱测定灵敏度、减少样品用量的一种有效的手段,是一值得深入研究和推广应用的超痕量分析策略。
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