【摘 要】
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根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5 F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组
【机 构】
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扬州大学生物科学与技术学院,扬州,225009
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根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5 F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F.将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F).重组菌以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,细菌对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重.将SL7207(pVAX1-F)分别以108 CFU和109 CFU的剂量三次口服免疫1日龄商品代伊莎褐蛋鸡,抗体检测结果显示,在三免后1周,SL7207(pVAX1-F)109 CFU剂量组的血清抗体效价与空载体组之间存在显著性差异(P＜0.05).重组菌两个剂量组在首免后2周开始出现黏膜抗体,并于二免后2周和3周达到较高水平.免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)109 CFU剂量组的保护率为77.27％,与空载体组之间存在显著性差异(P＜0.05).
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