基于定向PCR和UPLC-MS技术分析放线菌中的产物

来源 :第十二届全国抗生素学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ZAQWSX12344321
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
放线菌素D具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒的作用,并已经应用于临床治疗某些恶性肿瘤,其主要机理是干扰核酸的合成,并抑制DNA病毒的复制;此外,研究发现放线菌素D还能通过诱导细胞分化、诱导细胞凋亡、抑制一些蛋白酶活性及影响细胞周期等而发挥其抗肿瘤活性。放线菌素D主要是由非核糖体肽合成酶NRPS合成的,与本文非核糖体肽合成酶呈阳性相符。 UPLC-MS/MS由于其高效、高特异性和高灵敏度等特性,越来越多的应用于药物的分析和鉴定中,尤其应用于含有多种结构类似物或衍生物的分析鉴定和复杂的蛋白质鉴定。本研究尝试用UPLC-MS/MS分析和鉴定放线菌产生的次级代谢产物,鉴定出放线菌素D。 采用定向PCR方法从放线菌中筛选含Ⅰ型PKS基因和NRPS基因,结合UPLC-MS/MS分析,可作为快速发现聚酮类或聚肽类化合物的产生菌的一种手段。
其他文献
小链霉菌HCCB 10043主要活性产物为A21978C系列化合物,本实验室通过超高效液相色谱-高分辨质谱联用技术(UPLC-HRMS)对小链霉菌HCCB 10043在传统发酵条件下的重要代谢产物进行了分析,结合二级质谱解析、数据库检索与标品对照等多种手段快速鉴定出小链霉菌HCCB 10043中另外三组活性天然产物,分别为arylomycins A2,A4,A5,A6;氨肽酶抑制剂Valistat
目的:评价六种临床常用抗不动杆菌属抗菌药物相互联合对116株临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌作用.方法:琼脂棋盘稀释法测定亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、环丙沙星、舒普深、舒巴坦相互联合对116株对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、环丙沙星均耐药的多重耐药鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC),并计算部分抑菌浓度指数(FICI).结果:六种抗菌药物中阿米卡星与其它抗菌药物联合最容易产生协同效应,其中
目的:鉴定链霉菌Streptomyces sp.FIM-0916发酵液中的抗菌活性代谢产物并探讨其化合物的稳定性。方法:采用大孔吸附柱层析、常压反相色谱、高效液相色谱等方法对FIM-0916菌株发酵液进行分离纯化,通过现代波谱分析对获得的抗菌活性物质0916A进行鉴定。结果:从FIM-0916菌株发酵液中分离到1个环脂肽类化合物并具有相关抑菌活性,根据理化性质研究和波谱分析,证实该化合物与amph
研究响应面法优化超滤提取纽莫康定工艺.在单因素试验基础上对超滤操作压力、不同截留分子量膜组件、超滤时间三个因素进行Box-Benhken试验设计,以纽莫康定样品转移率为响应值,进行响应面分析.结果表明最佳参数为超滤压力0.24MPa、利用截留分子量8000 的膜组件、超滤时间32min,预测超滤纽莫康定样品转移率为83.24%,验证值为80.47%,与预测值的相对误差为2.73%.
目的:合成丙二醇头孢曲嗪。方法:7-ACA 与5-巯基-1.2.3-三唑钾盐反应制备得到头孢曲嗪中间体7-TACA,再与D-(-)-对羟基苯甘氨酸邓钾盐缩合,得到甲醇头孢曲嗪,纯化后转成丙二醇头孢曲嗪.结果:产品总收率32.4%,质量符合日本药典标准.结论:本工艺简单易行,为中试生产提供了依据.
目的:建立适合工业化生产的霉酚酸酯脱色新工艺.方法:通过烷烃溶剂和脱色介质结合方式对霉酚酸酯脱色工艺进行改进.结果:优化工艺的三批霉酚酸酯的生产验证产品各项质量指标(外观、纯度、溶剂残留量)均符合要求,收率达88.3 %.结论:本文所建立的新工艺操作简便,脱色效果显著,适合于霉酚酸酯的工业化生产.
目的:研究新生霉素的电喷雾多级质谱裂解方式.方法:采用电喷雾电离(ElectronSpray Ionization Source,ESI源)多级质谱,极性检出模式为正/负离子模式(+/-MS).结果:获得新生霉素的电喷雾电离多级质谱裂解方式.结论:该质谱裂解方式可应用于新生霉素及其类似物的快速结构解析、定量分析和药代动力学研究.
Background: Staphylococcus aureusis a virulent pathogen that is commonly found in hospitals and community environments.Methicillin-resistance S.aureus (MRSA),which has developed resistance to almost a
目的:分离鉴定海洋糖丝菌Saccharothrix sp.10-10代谢产物中的抗耐药菌活性成分。方法:基于生物合成基因序列分析结果,通过活性追踪,利用大孔吸附树脂、正反相色谱等多种色谱技术分离纯化活性成分,通过现代波谱学方法鉴定其结构。利用琼脂稀释法测定化合物的抗耐药菌活性,利用MTT法评价化合物的细胞毒性活性。结果:从中分离得到2个化合物,其结构确定为特曲霉素X(1)和氧代托马霉素(2).化合
诺加霉素是重要的蒽环类抗肿瘤抗生素,蒽环类抗生素是一类重要的抗肿瘤抗生素,其中柔红霉素,阿霉素和表阿霉素在临床上应用广泛。诺加霉素是一种由黑胡桃链霉菌ATCC27451发酵产生的新型蒽环类抗生素,对多种肿瘤细胞具有较强抑制活性,其生物合成途径中诺加糖胺的氨基甲基化过程促进诺加糖胺的形成和稳定,是诺加霉素发挥其抗肿瘤活性的一个重要前提。本研究从诺加霉素产生菌中克隆得到560bp的氨基甲基化酶(sno