【摘 要】
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本研究的目的是构建永生化胚胎肝细胞系并进行细胞移植的实验研究.方法：利用SV40T基因和真核表达载体pcDNA3.1经脂质体转染至体外分离培养的人胚胎肝细胞,使其永生化,进一步鉴
【机 构】
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第四军医大学唐都医院感染病中心,710038
【出 处】
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第三届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议
论文部分内容阅读
本研究的目的是构建永生化胚胎肝细胞系并进行细胞移植的实验研究.方法：利用SV40T基因和真核表达载体pcDNA3.1经脂质体转染至体外分离培养的人胚胎肝细胞,使其永生化,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能.采用D-gal诱导大鼠急性肝衰竭,分3组进行治疗实验,Ⅰ组:经脾脏移植永生化胎肝细胞2×107个;Ⅱ组:移植原代胚胎肝细胞2×107个;Ⅲ组:脾脏注射生理盐水1ml,各组大鼠同时肌肉注射环孢霉素A(CsA)10mg·kg-1.观察大鼠的存活率、肝脏功能、肝脏病理变化情况.结果：经G418700～300μg/ml筛选,40天后获得一株阳性克隆.形态学观察发现,该细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征,细胞核型无明显异常,转染细胞在软琼脂中不能生长,免疫组化证实SV40T基因已整合入细胞,而且该细胞具有合成白蛋白的功能.移植实验表明Ⅰ组及Ⅱ组大鼠存活率均显著高于Ⅲ组大鼠,肝脏功能及肝脏病理均有改善,Ⅰ组与Ⅱ组之间大鼠存活率无明显差异.结论：转染胚胎肝细胞具有与原代肝细胞类似的形态特征及生物学功能,经脾脏移植可明显改善D-gal诱导的肝衰竭大鼠的存活率,改善肝功能及肝脏病理,可以成为生物人工肝及肝细胞移植研究中的理想细胞材料.
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