人乳腺类组织化培养模型的体外构建与评价

• 作 者: 王秀丽;
• 机 构: 中国科学院大连化学物理研究所 大连116023
• 出 处: 第六届全国组织工程与再生医学大会
• 发表日期: 2013年期

目的:利用组织工程技术体外模拟人体内乳腺组织微环境,探讨间质细胞与上皮细胞的相互作用,构建人乳腺类组织化培养模型.
方法:采用活细胞体外标记技术,通过人脂肪干细胞(hASCs)-乳腺上皮细胞(MCF10A)共培养,以多孔丝素蛋白为三维支架并掺入ECM,体外构建人乳腺类组织化培养模型.以单一培养组为对照,考察细胞生长活性,并利用Whole-mount染色、H&E染色、免疫荧光染色及定量RT-PCR等技术对共培养模型的表型特征及功能活性进行评价;同时通过抗体阻断技术部分阐明基质细胞对上皮细胞的命运调控机制.
结果:丝素蛋白支架能够为MCF 1OA和基质细胞提供理想的微环境，促进其生长及分化。对比对照组内MCF10A(仅形成的腺泡状结构)，共培养组内细胞兼形成类腺泡和类导管状结构。该上皮类组织结构不但表达细胞连接，而且分化形成基底膜结构，表现出正确的极性口功能性基因表达证明:共培养组内MCF 10A的casein-α ,β的表达水平显著高于对照组。这说明基质细胞对乳腺上皮细胞的表型和功能会产生影响。而抗体阻断实验结果进一步揭示:由基质细胞通过分泌HGF促进上皮细胞形成导管状结构。
结论:结合丝素蛋白和3D共培养技术可成功构建人乳腺类组织化培养模型。该模型可为研究乳腺发育生物学及病理转化提供理想的研究体系。