【摘 要】
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本实验通过酵母真核表达系统获得猪γ干扰素，并通过淋巴细胞转化实验和抗病毒实验鉴定重组蛋白的生物活性。以ConA刺激24小时后的猪全血淋巴细胞提取的总RNA为模板，通过RT-PCR方法克隆出猪γ干扰素成熟蛋白基因，通过EcoRI和KpNI两个酶切位点使该基因插入到毕赤酵母表达载体（pPICZαC）中，并把线性化的该重组酵母表达载体通过电转的方式整合到酵母菌中，利用淋巴细胞转化实验和蛋白病变抑制法测定
【机 构】
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华南农业大学兽医学院广东省人畜共患病重点实验室,广东 广州 510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会教学专业委员会第六届第12次学术研讨会
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本实验通过酵母真核表达系统获得猪γ干扰素，并通过淋巴细胞转化实验和抗病毒实验鉴定重组蛋白的生物活性。以ConA刺激24小时后的猪全血淋巴细胞提取的总RNA为模板，通过RT-PCR方法克隆出猪γ干扰素成熟蛋白基因，通过EcoRI和KpNI两个酶切位点使该基因插入到毕赤酵母表达载体（pPICZαC）中，并把线性化的该重组酵母表达载体通过电转的方式整合到酵母菌中，利用淋巴细胞转化实验和蛋白病变抑制法测定表达的猪γ干扰素的生物活性。实验结果表明，成功表达出大小约30KD的猪γ干扰素，其抗VSV活性单位为1×106.1U/L，并能显著促进猪淋巴细胞的增殖。
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