沉默猪白细胞介素10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染的影响

• 作 者: 田永帅 陈义辉 刘珺 万小平 杨鑫 王红宁 高荣
• 机 构: 生物资源与生态环境教育部重点实验室,动物疫病防控与食品安全省重点实验室,四川大学生命科学学院,成都610064
• 出 处: 中国西部动物学学术研讨会
• 发表日期: 2012年7期
• 关键词: 猪IL-10 基因 RNA 干扰 基因表达 猪繁殖与呼吸综合症病毒 免疫细胞

为了研究藏猪免疫细胞中IL-10 基因表达抑制后对RNA 病毒感染及其免疫应答的影响,本实验构建和筛选了抑制猪IL-10 基因表达的shRNA 干扰分子及其表达载体,并以新型的壳聚糖接枝聚乙二醇和聚乙烯亚胺修饰分子(CS-N-PEI-PEG)通过离子交联法进行分子包装,制备DNA-壳聚糖纳米分子,体外转染藏猪免疫细胞,观察猪繁殖和呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)诱导免疫细胞IL-10 基因的表达及其增殖感染水平.在纳米分子转染后24、48 和72 小时,使用荧光定量PCR 技术对IL-10 基因及相关细胞因子IL-2、IL-4、IL-6 和IFN-γ 基因的mRNA 表达进行了检测,同时分析PRRSV 在免疫细胞中的增殖.