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目的：研究脐带间充质干细胞(uMSC)分泌的外泌体(Exosomes)对成骨的作用,并通过相应的体内及体外实验联合高通量蛋白质谱分析技术明确其具体的作用机制。方法：体外原代培养uMSC,通过收集3-6代uMSC培养上清,通过超速离心手段进行上清中uMSC分泌外泌体的收集。实验的分组具体为①通过超速离心及密度梯度离心分离的外泌体分离作为实验组；②将超速离心后上清作为去外泌体对照组；③将uMSC培养基作为阴性对照组；④将HEK293T细胞分泌的外泌体作为外泌体对照组进行后续实验。在体动物实验部分首先通过成骨细胞种植的骨胶原支架在不同组处理下植入裸鼠皮下进行在体成骨实验。于植入一个月后分别从骨密度、骨矿物质含量以及茜素红、碱性磷酸酶活性检测评估皮下成骨情况,明确uMSC来源外泌体对于成骨细胞在体成骨能力的影响。随后利用大鼠胫骨骨折模型进行不同组的干预,于处理两周后分别从骨折端的骨密度、骨矿物质含量以及免疫组织化学方法评估骨折愈合情况,明确uMSC来源外泌体对于在体成骨的作用。体外实验部分通过针对不同组处理的成骨细胞进行成骨基因改变、茜素红染色、碱性磷酸酶活性的检测明确uMSC来源外泌体对于成骨细胞的作用。最后利用高通量RNA测序分析及蛋白质谱分析手段明确uMSC来源外泌体对于成骨细胞作用通路及具体机制,并通过通路抑制及竞争的方法对该机制进行验证分析。