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目的：构建新型的以减毒伤寒杆菌(SL7207)为载体的抗结核DNA疫苗，以期获得一种安全高效的结核疫苗。
方法：本实验以Ag85B、ESAT6为目的基因，构建了原核(pGEX-KG-Ag85B)以及真核(pVA×1-Ag85B,pVA×1-Ag85B-ESAT6)表达质粒，并将真核表达质粒最终转入减毒伤寒杆菌(SL7207)中，获得以减毒伤寒杆菌(SL7207)为载体的新型结核疫苗SL7207(pVA×1-Ag85B)以及SL7207(pvA×1-Ag85B—ESAT6)，并将其应用于动物水平的实验研究。我们将构建正确的减毒伤寒载体疫苗、真核表达质粒、阳性对照BCG、阴性空载体对照以及空白对照生理盐水分别免疫实验小鼠，每隔两周免疫一次，共免疫三次，分别在每次免疫后两周取小鼠尾静脉血，末次免疫后两周处死小鼠进行体液免疫及细胞免疫学检测。采用ELISA法检测每次免疫后两周小鼠尾静脉血清中特异性抗体的效价及末次免疫后两周小鼠血清抗体亚型的效价;颗粒酶释放实验及ELISPOT法检测小鼠脾细胞细胞因子的分泌;末次免疫后两周在A3实验室进行小鼠H37Rv攻毒实验，观察小鼠的生存时间，攻毒后70天处死小鼠做脾肺的菌落计数，脾肺的病理切片观察等。
结果：未攻毒小鼠，血清中抗体随着免疫次数的增加而明显升高且减毒伤寒载体疫苗组明显高于空载体对照组，能产生针对结核杆菌的特异性抗体;减毒伤寒载体疫苗组小鼠的肠道sIgA水平最高，进一步提高机体的免疫力;细胞免疫检测中，ELISPOT结果显示载体疫苗组分泌IFN-的细胞数量明显高于对照组。而ILA不明显，呈现出以Th1型免疫反应为主的免疫应答;颗粒酶释放实验显示实验组的CD8+T淋巴细胞针对结核杆菌的特异性免疫应答增强;结核杆菌H37Rv攻读实验中，减毒伤寒杆菌载体疫苗组的小鼠生存时间明显长于对照组，菌落计数及病理切片也可以看出疫苗组病理损害较对照组轻。
结论：以减毒伤寒杆菌为载体构建的结核DNA疫苗，可以明显增强免疫小鼠的体液免疫以及细胞免疫应答，能提高感染小鼠的生存率并减轻病理损害，对结核杆菌感染具有高效的预防作用。