论文部分内容阅读
里氏木霉(Trichoderma reesei)是广泛用于木质纤维素降解酶生产的丝状真菌,T.reesei RUT-C30是纤维素酶生产的常用菌株,纤维素酶的生产效率比野生型有明显提高,但目前纤维素酶的生产缺乏廉价的诱导物以及高效的生产菌株,因此,纤维素酶较高的生产成本仍然是限制利用木质纤维素生物转化生产生物燃料和生物基化学品的主要瓶颈之一.开发廉价诱导物以及对里氏木霉菌株进行代谢工程改造,是降低纤维素酶生产成本,提高纤维素酶生产的重要研究内容.本课题组利用转苷反应制备了含有槐糖等寡糖的可溶性诱导物,并建立了高效批式流加发酵方法,提高了T.reesei RUT-C30纤维素酶产率.同时,利用人工转录因子构建了T.reesei RUT-C30人工锌指蛋白突变体文库,并利用转录组分析,研究了可能的调控机制.此外,还构建了含有Cre1结合结构域的融合转录因子过表达突变体,筛选得到可利用葡萄糖产纤维素酶的T.reesei RUT-C30突变体.对里氏木霉纤维素酶合成调控机理进行深入研究,有利于获得新的代谢工程改造靶点,并进一步通过代谢工程改造提高纤维素酶的生产效率.