【摘 要】
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目的 探讨在体内下调微RNA-21(miR-21)是否可能抑制肝纤维化.方法 构建针对性抑制miR-21的腺病毒Ad-TuD-21及其对照病毒(Ad-TuD-NC).24只雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳
【机 构】
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200003 上海长征医院消化内科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 探讨在体内下调微RNA-21(miR-21)是否可能抑制肝纤维化.方法 构建针对性抑制miR-21的腺病毒Ad-TuD-21及其对照病毒(Ad-TuD-NC).24只雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳12周制作实验性肝纤维化大鼠模型,8周后随机分为3组,分别给予尾静脉注射磷酸盐缓冲夜(模型组)、AdTuD-NC(Ad-TuD-NC组)、Ad-TuD-21(Ad-TuD-21组),每周2次,持续4周.治疗结束后,处死所有大鼠,取血进行生物化学检查,取出肝组织进行病理学检查检测纤维化程度.实时PCR、Western印迹法及免疫组织化学等检测miR-21靶基因、肝纤维化相关基因及细胞外调节蛋白激酶(ERK)1通路相关基因、肝细胞上皮细胞间质转型(EMT)相关标志物水平.结果 Ad-TuD-21显著抑制miR-21水平.Ad-TuD-21治疗组大鼠血清ALT及AST水平显著低于模型组及Ad-TuD-NC组.Ad-TuD-21治疗后较模型组及Ad-TuDNC组肝细胞变性、坏死减轻,胶原面积明显减少(P＜0.01),纤维化程度减轻(P＜0.05).α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)1明显下调,基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9显著上调.此外,实时PCR及免疫双标表明Ad-TuD-21可在体内促进肝星状细胞(HSC)中SPRY2表达,抑制ERK1通路活性；增加肝细胞中肝细胞核因子(HNF)4α表达,阻断肝细胞EMT进程.结论 下调miR-21可在体内抑制大鼠实验性肝纤维化,可能成为肝纤维化临床治疗的靶点之一.
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