家蚕STAT基因的克隆、表达及多克隆抗体制备与组织表达差异分析

来源 :中国蚕学会第六届青年学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:double3A
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为了验证家蚕STAT基因在性细胞决定中的作用,了解STAT基因在家蚕雌雄性腺中的表达差异,通过电子克隆的方法克隆了家蚕STAT基因,并进一步通过RT-PCR获得了家蚕STAT的cDNA基因。通过构建的pET28a-STAT原核表达载体进行了诱导表达,SDS-PAGE检测表明82kD的融合重组蛋白被高效表达。重组蛋白经His柱纯化后,再经SDS-PAGE染色切胶收集作为抗原,免疫小鼠获得了多克隆抗血清,对来自家蚕雌雄性腺蛋白的western blotting检测表明,在家蚕的雄蚕性腺中,可检测到2条特异约82kD的蛋白质条带,推测STAT基因存在可变剪接。
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