【摘 要】
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目的:观察雷公藤甲素对卵巢颗粒细胞自噬的影响.方法:CCK8法检测不同浓度雷公藤甲素对原代培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的抑制作用,并计算出细胞半数抑制浓度值(IC50);Western-blotting法检测不同刺量和不同时间点雷公藤甲素对原代培养颗粒细胞自噬的影响,确定出雷公藤甲素诱导原代培养颗粒细胞自噬的最佳时间和最佳用药剂量;Western-blotting法检测雷公藤甲素诱导的颗粒细胞自噬对B
【机 构】
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成都中医药大学,四川成都610075 成都中医药大学附属医院,四川成都610072
【出 处】
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四川省中医药学会第15届中医妇科学术交流会
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目的:观察雷公藤甲素对卵巢颗粒细胞自噬的影响.
方法:CCK8法检测不同浓度雷公藤甲素对原代培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖的抑制作用,并计算出细胞半数抑制浓度值(IC50);Western-blotting法检测不同刺量和不同时间点雷公藤甲素对原代培养颗粒细胞自噬的影响,确定出雷公藤甲素诱导原代培养颗粒细胞自噬的最佳时间和最佳用药剂量;Western-blotting法检测雷公藤甲素诱导的颗粒细胞自噬对Beclin1、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、P62、p-pi3k,p-Akt及p-mTOR蛋白表达的影响.
结果:(1)雷公藤甲素作用于大鼠卵巢颗粒细胞的IC50为14.65μM.(2)雷公藤甲素浓度为100nM时,即能够显著诱导大鼠卵巢颗粒细胞发生自噬.(3)雷公藤甲素(100nM)作用于大鼠卵巢颗粒细胞12h后,能够显著促进Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表达水平,并抑制LC3-Ⅰ及p62的表达水平.(4)雷公藤甲素(100nM)作用于大鼠卵巢颗粒细胞12h后,能够显著抑制p-pi3k,p-Akt及p-mTOR蛋白的表达水平.
结论:雷公藤甲素可能通过抑制PI3k/Akt/mTOR信号通路诱导大鼠卵巢颗粒细胞的自噬.
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