【摘 要】
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目的：研究在急性心肌梗死/再灌注猪模型的间充质干细胞同移植期使用通心络易化是否能够改善移植细胞的生存和生物学活性.方法：28头中华小型猪被分为4组,分别为对照组(n=7),第二组为通心络组(自心肌梗死前3天用药直至梗死后第4天,n=7),第三组为MSCs移植组(n=7),第四组为通心络易化的MSCs移植组(通心络+MSCs移植,n=7).急性心肌梗死/再灌注模型由阻断冠状动脉左前降支90分钟制成,
【机 构】
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中国协和医科大学/中国医学科学院阜外心血管病医院 北京,100073 武汉大学人民医院心内科 武汉
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目的：研究在急性心肌梗死/再灌注猪模型的间充质干细胞同移植期使用通心络易化是否能够改善移植细胞的生存和生物学活性.方法：28头中华小型猪被分为4组,分别为对照组(n=7),第二组为通心络组(自心肌梗死前3天用药直至梗死后第4天,n=7),第三组为MSCs移植组(n=7),第四组为通心络易化的MSCs移植组(通心络+MSCs移植,n=7).急性心肌梗死/再灌注模型由阻断冠状动脉左前降支90分钟制成,再灌注后即刻经心肌内注射DAPI标记的自体骨髓MSCs(3×107 cells/动物).在移植后1周(基线)和6周(终点),以单光子发射计算机化断层显象检测心肌灌注缺损面枳,以核磁共振检测心功能.6周后处死动物,以免疫荧光检测移植细胞的在体存活和分化;以TUNEL法检测梗死周边心肌凋亡;分别以黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测梗死周边心肌的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等氧化应激指标;以Western blot免疫印迹法检测梗死周边心肌炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达.结果：在实验终点,与对照组、第2组和第3组相比,通心络易化的MSCs移植组纤维化和炎症细胞浸润显著减轻,并伴较多的存活心肌.与MSCs移植组相比,通心络易化的MSCs移植组移植细胞的在体存活和成心肌分化能力均显著增强(P＜0.01);与另外3组相比,通心络易化的MSCs移植组梗死区和梗死周边区毛细血管密度也明显增加(P＜0.01).SPECT显示4组的灌注缺损面积在基线时无显著差别(50.7％±14.5％,52.7％±15.5％,51.8％±16.5％,49.4％±16.0％,P＞0.05),但是在实验终点,和对照组相比,仅通心络易化的MSCs移植组灌注缺损面积显著减小(22.1％±9.3％vs47.8％±11.1％,P＜0.01).MRI显示在基线时各心功能参数无显著差异(P＞0.05);在实验终点,和对照组相比,仪通心络易化移植组的左室射血分数(LVEF)显著增加(50.0％±10.1％vs43.9％±7.6％P＜0.01),室壁运动障碍节段数、梗死室壁增厚率、梗死面积和左室质量指数均显著减小(P＜0.01).终点时,和对照组相比,在通心络组和通心络易化移植组梗死周边区的心肌凋亡均显著减轻(P＜0.01),SOD显著增加(P＜0.05),MDA显著减少(P＜0.05),炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均显著减少(P＜0.05).结论：本实验表明:(1)在急性心肌梗死/再灌注后即刻心肌内移植的自体骨髓MSCs在体生存和分化能力有限,并未产生显著的功能学获益;(2)围移植期使用通心络易化可显著改善梗死心肌局部微环境,有利于移植细胞的存活和分化,从而产生显著的心功能获益.
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