【摘 要】
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目的:建立即時、動態、直接的肥大細胞脫顆粒光學成像檢測方法。方法:將囊泡表面特異性分子CD63與綠色螢光蛋白(Green Fluorescence Protein, GFP)的基因融合後,通過質粒轉
【机 构】
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中國中醫科學院醫學實驗中心,北京100700
【出 处】
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2011年首届海峡两岸中医药、亚健康暨抗衰老医学论坛
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目的:建立即時、動態、直接的肥大細胞脫顆粒光學成像檢測方法。方法:將囊泡表面特異性分子CD63與綠色螢光蛋白(Green Fluorescence Protein, GFP)的基因融合後,通過質粒轉染入細胞中,建立穩定表達CD63-GFP蛋白的鼠肥大細胞株(RBL-2H3細胞)。之復利用鐳射掃描共聚焦顯微鏡及全內反射顯微鏡分別觀察細胞內囊泡在過敏原刺激下脫顆粒時的運動狀況。結果:成功建立穩定表達CD63-GFP的RBL-2H3細胞株;在類過敏原的刺激下,用鐳射掃描共聚焦顯微鏡觀察到了細胞脫顆粒過程中,細胞內囊泡向細胞外脫出的過程,同時,用全內反射顯微鏡觀察到了細胞內囊泡與細胞膜融合的過程。結論:本研究在活細胞狀態下,即時、直觀、靈敏、快速地觀察到肥大細胞脫顆粒的過程,直接評估過敏原刺激肥大細胞脫顆粒的特性,為類過敏反應的檢測提供了新的檢測手段。
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