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目的 研究表明,颗粒物自身的表面效应以及其吸附的金属和有机成分等能够诜导细胞产生自由基,引起DNA的单链或双链断裂.有研究通过研究检测细胞释放的与炎症反应相关的细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-6等),推测转录调节核因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在颗粒物毒作用过程中起到核心的调节作用.PM2.5可通过ROS/RNS途径诱导NF-κB活化.因此,本研究采集了北京城区大气PM2.5,以A549细胞为模型,研究其对细胞增殖、DNA链损伤、NF-κB活性表达及NO诱导的影响,了解北京城区PM2.5对A549细胞的损伤作用,为PM2.5的毒理作用机制提供科学依据.方法 采用MTT法测定细胞毒性作用,单细胞凝胶电泳检测DNA单链和双链损伤程度,ELISA法检测核因子-κB(NF-κB)的活性,Western blot方法检测核内NF-κB p65亚基的表达及硝酸还原酶法检测NO的含量.结果 (1)PM2.5对A549细胞在25、50μg/ml时促进细胞增殖、而在100～ 1200μgml时抑制细胞增殖,1200μg/ml时细胞存活率仅为19.99％.呈明显的剂量-反应关系(r=0.921,p＜0.01).(2)随着染毒剂量的增大,DNA单、双链损伤程度随之增大,且与对照组相比存在明显的差异(p＜0.01),各指标均存在剂量-效应关系.同浓度下尾长指标比较,可见双链损伤均高于单链损伤,差异极显著(p＜0.01).(3)随着PM2.5染毒剂量的增大,NF-κB的活性在胞核中逐渐增高,而在胞浆中逐渐减小.对于NF-κB活性胞核组,PM2.5各剂量组与对照组比较,均具有极显著差异(p＜0.01),且存在明显的剂量-效应关系(r=0.982,p＜0.01).100μgml的PM2.5可引起细胞核内NF-κB p65亚基的显著高表达.(4)随着染毒剂量的加大,PM2.5诱导A549细胞产生的NO表达量明显增加,与对照相比均具有极显著差异(p＜0.01),且存在明显的剂量-效应关系(r =0.980,p＜0.01).将PM2.5相同浓度处理组的核NF-κB表达活性与NO表达量作相关分析,得r =0.952,p＜0.01,回归方程为y=5506.030x-288.136(x为NF-κB OD值,y为NO含量).可见,PM2.5各浓度组对A549细胞诱导产生的NO的表达均与NF-κB的活化存在密切的相关性,说明NO的释放可能与NF-κB的活化有关,可能是NF-κB的直接下游表达产物.结论 PM2.5可造成A549细胞的氧化和炎症损伤,诱导细胞质中有活性的NF-κB向核内转移来行使其调控炎性反应的功能.