【摘 要】
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NJ-18是一株从土壤中分离出来的具有广谱抗菌活性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),具有很好的生防潜力.为研究NJ-18与作物互作关系,在激光共聚焦显微镜下观察外源导入绿色
【机 构】
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南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室,南京210095
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NJ-18是一株从土壤中分离出来的具有广谱抗菌活性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),具有很好的生防潜力.为研究NJ-18与作物互作关系,在激光共聚焦显微镜下观察外源导入绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的NJ-18菌株在小麦根部的定殖能力.首先使用十二烷基硫酸钠(SDS)消解NJ-18的质粒,然后采用化学法导入gfp分子标记,并采用激光共聚焦显微镜检测该标记菌株在小麦根部的定殖能力.获得了NJ-18的质粒消解菌株C136,并采用化学方法成功将外源基因导入野生型菌株N J-18及其质粒消解菌株C136,但是,后者的转化效率可达到3.42x105 cfu/μg质粒DNA,是前者转化效率的10倍左右.对比NJ-18与C136的生物活性发现,C136能够保持原有的抑菌活性;但是C136的生长曲线第一峰值出现的时间滞后12h,第一峰值被抑制了29.4％; NJ-18-GFP能够附着在病原菌菌体上,导致其菌丝呈现膨大、畸形等;接种7d后能够在小麦根部表皮和中柱稳定定殖.枯草芽孢杆菌NJ-18菌株的转化方法宜选用化学法;能够在小麦根部定殖.
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